紫外可见分光光度计操作方法介绍

  分光光度计慢慢的变成了现代分子生物实验室常规的仪器，常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。

  仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

  分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，由此产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

  单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：

  物质对光的选择性吸收波长，及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度，即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。

  2. 将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档。）

  4. 将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。

  6. 盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。

  1．该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。

  2．使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行全方位检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。

  3．在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这样的一种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

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