紫外、紫外分光光度计、可见分光光度计、UV

  紫外（UV）是电磁波的一种，其波长在10纳米到400纳米之间。它被大范围的应用于多个领域，例如材料科学、化学、生物学、医学等。 紫外分光光度计是一种专门用于测量样品吸收UV辐射强度的仪器。该仪器包含一个光源，可以产生一定波长范围内的UV光线，并且具有一个样品室，样品被置于其中以使UV光线透过样品做测量。然后，该仪器通过比较所发出的光与通过样品后所接收到的光，来确定样品吸收的 UV 强度。 紫外可见分光光度计是一种比紫外分光光度计更为普遍的使用的仪器。紫外可见分光光度计可测量可见光和紫外光谱区域内的样品吸收强度。与紫外分光光度计不同，它也能够适用于测量样品在可见光范围内的吸收。在此类仪器中，样品被置于一个宽的透光盒内，透过其中的UV或可见光线做测量。 UV指的是紫外线，是紫外和可见光辐射的缩写。 UV 有着非常强的能量，对某些物质会产生化学反应，如臭氧在大气中的生成，也能够适用于杀菌、消毒等应用。

  TU-1810SPC紫外/可见分光光度计使用心得十月TU-1810SPC紫外可见分光光度计是北京普析通用仪器有限责任公司生产的产品，可独立完成光度测量、定量测定、光谱扫描、时间扫描、DNA/蛋白质测量及三维图谱分析等功能，其波长范围为190-1100 nm，光谱带宽：0.5、1、2、5 nm（四档可变狭缝），波长准确度：±0.3 nm，光度范围：-0.3～3.0Abs，光度准确度：±0.002 Abs（0～0.5 Abs），该款分光光度计具有非常出色的技术指标及稳定可靠的工作特性，流畅的人机对话操作（测定结果稳定可靠，操作简单便捷），可使用户得到满足各种分析工作的需求诸如光度测量、光谱扫描、时间扫描及三维图谱分析等，且售后服务良好，深受广大分析工作者的喜爱，在基层实验室有广泛的装备应用。本实验室在2005年装备了该款分光光度计，大多数都用在光度测量、定量测定、光谱扫描、时间扫描，现就光谱扫描、时间扫描应用情况谈几点体会。光谱扫描:主要是为了测量某物质的吸收光谱曲线以获得该物质的最大吸收波长(λmax)，这对于没有光谱扫描功能的光度计而言则是挺麻烦且费时的，特别是对于稳定性较差的物质要想获得准确的λmax还是很难的，但对于有光谱扫描功能的光度计而是很容易的，所以应用好仪器的光谱扫描功能，可以很方便测定出某物质的吸收光谱曲线，而后通过峰值检出来确定该物质的λmax并用于该物质的光度测定。进行光谱扫描时，首先是要确定扫描的波长范围即起始和终止波长，一般可根据待扫描物质的性质如颜色等大致确定其λmax，如红色物质其λmax位于500 nm左右，那么其光谱扫描的波长范围可选择400～600 nm，例如：盐酸氯丙嗪可氧化成红色化合物，经对350～600 nm波长范围扫描确定其λmax位于525 nm波长处，试剂空白的λmax位于360 nm波长处，见图1。图1 盐酸氯丙嗪氧化产物扫描光谱图而对于蓝色物质其λmax位于600 nm左右，那么其光谱扫描的波长范围可选择500～700 nm，例如：蓝色的铁（Ⅱ）-硫代紫尿酸配合物，经对300～800 nm波长范围扫描确定其具有两个吸收峰分别位于658 nm和384nm波长处，图2。具体扫描时先可以再一次进行选择一个大致的波长范围进行扫描，再依据情况进行适当调整，从而方便获得合适的扫描光谱图。图2 铁（Ⅱ）-硫代紫尿酸配合物扫描光谱图其次是要确定合适的扫描波长间隔，可根据不同的精度要求选不一样的扫描波长间隔，对λmax数据精度要求比较高时可选择较小的扫描波长间隔如0.2nm，反之可选择较大的扫描波长间隔如0.5nm或者1nm甚至更大。总之要选择正真适合的扫描波长间隔以获得准确的λmax数据。第三是要确定适宜的扫描速度，对于稳定性高的物质可采用慢速和中速扫描，反之对于稳定性差的物质可采用快速扫描，这样可获得准确的光谱曲线及λmax数据。第四是要确定适宜的吸光度范围（扫描光谱图纵坐标）范围，以便显示扫描光谱图的全貌。如图1、图2的吸光度范围分别为0～3.5和0～2.0，对于有负吸光度的可以从负数开始，一切以能显示扫描光谱图的全貌为目的。2、时间扫描：一是为了监测某化学反应的吸光度随时间变化的曲线以获得该化学反应达到的最大反应速率（吸收度）的时间。该功能非常适合于动力学光度法中反应平台区的确定。二是可以观察某物质吸光度随时间变化的曲线，以监测该物质的稳定性。如CN-与异烟酸-硫代巴比妥酸反应首先形成红色染料，然后逐渐变成蓝色，其吸光度A525先是快速上升达到稳定最大值然后很快下降，而A642上升及下降的速度均较缓慢，但室温系在525nm和642nm吸光度分别在2min和35min左右可达最大值且分别在2～3min和15～20min内基本稳定，见图3。图3 CN--异烟酸-硫代巴比妥酸体系在525 nm（0～20min）和642nm（0～60min）处的时间吸收曲线时间扫描时先要确定扫描波长即光度测量波长，一般为物质的最大吸收波长；其次要确定扫描时长，以获得化学反应的吸光度随时间变化的趋势，或物质吸光度随时间变化的趋势，以提示物质的稳定性数据。

  紫外可-见分光光度计使用心得TU-1950紫外可-见分光光度计是实验室常规分析仪器，简单易操作，性能还是较为稳定的。我们中心2017年购置，到现在6年了，始终没出现故障，可是最近突然出现了问题。一开始是做熟肉中亚硝酸盐时平行样品和加标回收都不好，平行样品实测差超过20%，回收率只做到72%，之前平行样品实测差一般都在5%以内，回收率在90%以上。但标准曲线线性还可以。接连复查了两次，结果都不太好。一直以为是实验过程中操作有问题，根本没有怀疑仪器发生故障。恰恰此时，接到省职防院水溶液中氨的质控考核样品，使用纳氏试剂分光光度法测定。加完试剂显色稳定后进行比色，在调零时发现调零后示值不稳定，会从0.000跳到0.001或0.002，比色池盖子掀起来和盖下去示值相差比较大，同一样品比色完毕接着重复比色示值相差也比较大，标准曲线低浓度比色示值甚至跳管，较高浓度的吸光值反而低。我们怕环境湿度大对仪器有影响（之前的岛津紫外出现过湿度大无法开机现象），又持续开机预热，除了开着空调除湿，还开了除湿机，又反复试了几次，仪器校准能顺利通过，但仪器示值依然不稳。这才确定是仪器出了问题。咨询工程师，怀疑是滤光片雾化。工程师过来后，先排除了氘灯和钨灯的问题，又做了波长校正和暗电流校正，打开仪器查看滤光片，有些许雾化，不影响正常使用。工程师忙了整整一个上午，对仪器进行了深度的维护，再测试，发现仪器示值稳定了。通过这次紫外可-见分光光度计故障的排除，我们得到了很多启示，在仪器使用的过程中一定要注意维护以延长其使用常规使用的寿命。在TU-1950紫外可-见分光光度计使用过程中一定要注意的问题：1、 仪器每次使用完毕需要认真用棉签或棉球擦拭干净比色池和比色架，保持比色系统洁净无尘无污染；2、 使用完擦拭干净的比色池旁边放一小包用纱布包着的硅胶防潮；3、 每次比色完毕后拿出比色皿，把波长调至660nm，使螺杆归位后再关机；4、 每半年或一年做一次波长校正和暗电流校正，波长校正时比色池不放比色皿，暗电流校正时样品路要放遮光皿。    这是我在使用TU-1950紫外可-见分光光度计的一些心得，大家有什么不同看法或好的建议，我们大家可以交流讨论。

  【仪器心得】耶拿紫外可见光分光光度计 PLUS使用心得 1. 关于耶拿紫外可见光分光光度计 PLUS的使用经验：这台紫外的光源是可见光区用白炽光源，用的是钨丝灯设备的开机运行预热。启动计算机，进入 windows 操作系统。 点击桌面上的 winaspect 图标，启动软件系统。 执行 measurement 里面的 initialize 进行初始化设备，此时氙灯亮。 等待 20 分钟进行光源和设备的预热。 执行 measurement 里面的 set parameters 进行参数的设定 执行 measurement 中的 standard correction 进行标准校正，此时光度计上面两个 mount 上必须没有一点样品。 参比样品装入及测量 测定 A+B 时，在两个比色皿中装入 B。 两个比色皿固定在 mount 上，毛玻璃被卡住。 执行 measurement 中的 regerence measurement 进行参比样品测量，没有实际结果，实际是一个校 正的过程。 实际样品装入以及测量 里面的参比样品不能动，将外面的参比样换成待测样品 洗干净外面的比色皿，装上 A+B。 将样品比色皿固定到 mount 上。大家使用时候肯定要注意比色皿只能接触毛玻璃侧面。 2.仪器的优点和不足我们现在用的18槽的产品，也就应该更换18个点位的，样品可以同时检测或者逐个检测。这个套设备价格大概16W左右。但是操作很方便。在耗材方面厂家给带了比色皿只有一个，这里不建议我们大家买原厂家的，价格贵而且没什么意义。国产可完全代替。 3.总结在波长设计上面，符合所有药典和食品国标的光谱带宽：0.2、0.5、1、2 和 4 nm，五档可调，PC控制，数据处理方面，可设置数据报告形式波长范围：185-1100nm。这个波长应用没有一点问题。